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    操作細胞鋪板實驗技巧
    發布時間:2020-06-16   點擊次數:51次

    細胞生物學試驗,細胞鋪板大概是常見的一個試驗。但是有很多人不是很得辦法,鋪得不是很均勻:要么中心密周圍稀,要么周圍密中心禿頂。怎么辦呢?以下來自技能人員詳細解析,請收好了!

     


    一般96孔板,每孔是加100微升細胞懸液,從孔的左邊靠近底部加入,加完半邊板后,將未加的細胞懸液混一下再繼續加剩下的半邊板子,都加完后蓋上蓋子,左手悄悄扶住板的左邊,右手悄悄敲擊板的右邊緣,留意掌握力度(我一般輕巧敲三下),太強或次數太多會導致細胞會集成堆,將板順時針旋轉(逆時針作用不好),順次敲擊剩下三個邊,靜置約5分鐘,放入37度培育箱。

    6孔板、12孔板或24孔板,均可采用將個孔加入少量無血清培育基,晃動滋潤整個孔底,然后用移液槍吸至第二孔,同樣辦法滋潤孔底,其它孔一次類推,這樣整個孔底都是濕潤的,細胞懸液會平鋪在整個孔底,加細胞懸液的時候能夠防止加在中心,中心細胞多,而加在周邊晃勻后會出現周邊細胞多中心少的現象,細胞渙散較均勻,留意加完細胞懸液后要放工作臺靜置一下。

    細胞懸液加完后,將細胞培育板舉高,對著燈光,從底部往上看,看細胞有沒有抱團。然后從底部敲擊,使之渙散。假如試驗室有平板振動器的話,建議用這個儀器稍振動一下,作用不錯,振幅小,頻率高。

    細胞要盡量打散,大部分呈單個狀態。離心后,要充沛懸浮。還有轉移到六孔板后,需求晃動,晃的時候不要讓細胞液轉圈,不然細胞就全被帶到中心去了,就會不均勻。
      
    一瓶細胞長滿后,正常處理,在培育瓶里吹勻,然后鋪6孔板,每孔2毫升,鋪完之后不必調查直接用酒精棉擦拭,然后放到培育箱里,輕微的左右前后各三圈。基本上24小時之后再調查,每孔的細胞都會很均勻。

    計算好所需求的悉數液體量和細胞量,混勻后,加到六孔板里,六孔板按橫8字型晃,顯微鏡下調查,假如不均勻,按上述辦法再晃。假如細胞未計數直接種的話,在種六孔板的過程中,隨時晃一下混勻用的瓶子。 

    放在水平板面上先上下移動,再左右移動,每個方向5到6次,但要害的是搖晃后直接放入培育箱中,不要再做過多的運動,例如放到鏡下去看,不然很容易就又聚到中心去了。

    以上呢,就是如何把細胞鋪板鋪均勻的辦法,以上技能文獻僅供參考,如您還有疑問您可來自咨詢我司技能專員,為您答疑解難!本司是一家出產和銷售科學研發用試劑產品,范疇包括化學、分析化學、生命科學和材料科學等根底創新范疇,助力客戶的研討方案,在廣大科研用戶的協助和支持下,經過不懈的努力,以過硬的產品質量和洽的服務態度,為客戶提供一個安穩平臺,成為客戶可信賴的長期合作伙伴。

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